妊娠期高血压疾病是妇科的常见病，常伴有并发症的发生，在我国其发病率在9.4%～10.4%[1]。在疾病的发生过程中，肾脏是最先受累的器官，也是引起妇婴死亡的主要原因，其死亡率高达27.5%[2]。故对于妊娠高血压综合征患者早期诊断，早期干预和治疗成为改善妊娠结局的关键性因素。目前实验学指标对于妊娠高血压疾病的诊断价值众说不一，有研究表明视黄醇结合蛋白(retinol-binding protein， RBP)参与细胞内和血清的视黄醇蛋白的转运，是一种低分子量的蛋白，与视黄醇结合呈复合体，防止从肾小球中丢失[3]；转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)在滋养细胞的增殖、分化、内分泌和免疫功能具有重要作用，而妊娠高血压综合征的发病机制与滋养层细胞的生物学行为具有密切关系，现已经证实TGF-β1与妊娠高血压综合征具有密切联系，而与肾功能方面的影响未见研究[4-5]；尿转铁蛋白为中分子蛋白，不能通过肾小球滤过屏障，当妊娠高血压综合征时，肾脏血流量减少，血管通透性增加，尿液中出现尿转铁蛋白[6]。本组通过检测妊娠高血压疾病患者尿液中RBP、TGF-β1和转铁蛋白的含量，观察其在妊娠高血压患者肾损害中的临床意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选择2015年1月至2016年12月在同济大学附属第十人民医院就诊的妊娠高血压综合征患者96例为妊娠高血压组，其中妊娠期高血压患者29例(Ⅰ组)，轻度子痫前期患者36例(Ⅱ组)和重度子痫前期患者31例(Ⅲ组)，均符合妊娠期高血压疾病的诊断标准[7]。年龄22～35岁，平均(28.34±2.16)岁；孕周28～41周，平均(34.61±4.16)周；体质量46～85kg，平均(57.16±6.15)kg；孕次1～3次，平均(2.13±0.17)次；初产妇32例，经产妇64例。按照内生肌酐清除率(Ccr)将妊娠高血压患者分为肾功能正常组(Ccr<80ml/min)51例，肾功能异常组(Ccr≥80ml/min)45例。选择同期在我院检查的孕妇60例，为正常妊娠组，其中年龄20～35岁，平均(28.61±1.95)岁；孕周28～41周，平均(34.46±3.15)周；体质量46～85kg，平均(57.37±5.67)kg，孕次1～3次，平均(2.09±0.16)次，初产妇21例，经产妇34例。排除患者有原发性高血压，糖尿病，冠心病等慢性疾病；心、肝、肾等重要脏器功能不全；肝炎，结核和肺炎等急慢性感染；血液病，内分泌障碍和恶性肿瘤患者。各组在年龄，体质量和孕次等一般资料差异无统计学意义，具有可比性。
1.2 方法
妊娠高血压组和正常妊娠组入院时，收集晨尿 10ml，离心半径10min，3000r/min，离心5min取上清液，置于 -70℃ 冰箱中保存。采用ELISA(试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司)法测定尿RBP、TGF-β1和转铁蛋白水平。用人RBP，TGF-β1和转铁蛋白抗体包裹微孔板，制成固态相，加入血清样品，在与HRP标记的RBP、TGF-β1和转铁蛋白抗体结合，形成抗原-抗体-酶标记抗体复合物，经洗涤后加底物显色。用酶标仪在450nm处测定光密度值(D450)，通过标准曲线计算出样品的浓度。
1.3 统计学处理
所有的数据均采用SPSS 20.0软件包进行统计学分析，正态分布的计量资料采用
表示，两组计量资料的比较差异t检验，多组计量资料的比较采用方差分析，两两比较采用q检验。计数资料采用率表示，两组率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 各组尿RBP、尿TGF-β1和尿转铁蛋白水平的变化
妊娠高血压组的尿RBP、TGF-β1和转铁蛋白水平明显高于正常妊娠组，差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。
表1 各组尿RBP、尿TGF-β1和尿转铁蛋白水平的变化
Tab.1 Changes of urinary RBP， TGF-β1 and transferrin levels in each group (mg·L-1)
组别n尿RBP尿TGF-β1尿转铁蛋白正常妊娠组600.86±0.1814.29±2.672.64±0.76妊娠高血压组963.64±0.9327.64±3.155.31±1.02t值22.86227.26517.464P值0.0000.0000.000
2.2 尿RBP、尿TGF-β1和尿转铁蛋白水平与妊娠高血压的关系
尿RBP、TGF-β1和转铁蛋白水平随着妊娠高血压严重程度的增加而增加(P<0.01)，见表2。
表2 尿RBP、TGF-β1和转铁蛋白水平与妊娠高血压的关系
Tab.2 Relationship between urinary RBP， TGF-β1， transferrin levels and gestational hypertension (mg·L-1)
组别n尿RBP尿TGF-β1尿转铁蛋白Ⅰ组292.37±0.6821.65±2.654.29±0.86Ⅱ组363.56±0.98a26.37±3.12a5.32±0.98aⅢ组314.92±1.21ab34.72±3.69ab6.25±1.16abF值50.007128.03028.197P值0.0000.0000.000
与Ⅰ组比较，aP<0.01；与Ⅱ组比较，bP<0.01
2.3 尿RBP、尿TGF-β1和尿转铁蛋白水平与妊娠高血压患者肾功能的关系
妊娠高血压患者肾功能异常组尿RBP、TGF-β1和转铁蛋白水平明显高于肾功能正常组(P<0.01)，见表3。
表3 尿RBP、尿TGF-β1和尿转铁蛋白水平与妊娠高血压患者肾功能的关系
Tab.3 Relationship between urinary RBP， TGF-β1，transferrin levels and renal function in patients with PIH (mg·L-1)
组别n尿RBP尿TGF-β1尿转铁蛋白肾功能正常组512.69±0.8625.34±2.864.86±0.95肾功能异常组454.72±1.1630.25±3.755.82±1.21t值9.8127.2604.348P值0.0000.0000.000
2.4 妊娠高血压患者尿RBP、尿TGF-β1和尿转铁蛋白之间的相关性分析
妊娠高血压患者尿RBP水平与尿TGF-β1(r=0.756，P<0.05)和转铁蛋白(r=0.841，P<0.05)水平呈正相关，而尿TGF-β1水平与尿转铁蛋白水平呈正相关(r=0.654，P<0.05)。
3 讨 论
妊娠高血压疾病是妊娠期妇女特有的疾病，为常见的代谢综合征之一，其发病机理主要是全身性小血管痉挛和各脏器的血液灌流量减少，严重影响母婴的健康。妊娠高血压性肾病是常见的严重并发症之一，在疾病的发展过程中，肾脏的损害是无法避免。但妊娠高血压早期的肾损伤是可逆的，早期干预能够予以控制。故早期发现肾功能损害对于高血压治疗和预后具有重要意义。
本组研究表明妊娠高血压组尿液中的RBP水平明显高于正常妊娠组，并且发现随着妊娠高血压疾病严重程度的升高而升高，肾功能异常患者的尿液中的RBP水平明显高于肾功能正常的患者，说明尿液中的RBP水平是反应妊娠高血压疾病严重程度的重要指标，也是反映是否存在肾脏受损的重要指标。RBP是一种低分子量的蛋白质，由肝脏合成，将视黄醇转运至上皮细胞[8-9]。正常情况下，90%的RBP与甲状腺结合蛋白结合，不能被肾小球滤出，而游离的RBP几乎全部被近曲小管完全被重新吸收而分解，故尿中排除的RBP量十分稳定，在0.1μg/min以下，可以作为肾小管损伤的标记物[10]。妊娠高血压疾病时，患者由于肾脏血管痉挛，肾血流量出现明显下降，组织出现缺血，缺氧，血管通透性明显增加，导致大量的RBP漏出而不能被近曲小管吸收，尿液中的RBP水平明显增加，表现为肾功能异常患者尿液中的RBP水平明显高于肾功能正常患者，与文献报道妊娠高血压综合征患者尿液中的RBP水平升高一致[8]，说明RBP是妊娠高血压综合征患者观察肾脏功能损伤的重要指标之一。
本组研究表明妊娠高血压疾病患者的TGF-β1水平明显高于正常妊娠者，并且随着妊娠高血压疾病严重程度的升高，机体的TGF-β1水平出现明显升高，肾功能异常患者尿中的TGF-β1水平明显高于肾功能正常的患者，说明TGF-β1是反映妊娠高血压疾病严重程度和肾脏损伤的重要指标。现有的研究表明，其主要表达于合体滋养细胞，在滋养细胞的增殖，分化，免疫和内分泌调节方面具有重要意义[11]。当妊娠高血压综合征疾病发生时，引起胎盘过度表达TGF-β1水平，后者引起妊娠高血压综合征疾病的病理生理过程，综合文献主要通过以下几个方面介导肾脏的损害[12-14]： (1) 通过抑制基质金属蛋白酶和促进基质金属蛋白酶抑制剂的表达，增加肾外基质的合成，导致肾脏细胞间正常连接破坏，导致肾小球功能受损；(2) 促进肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞肥大和表型转化，诱导纤维细胞转化，抑制正常细胞的增殖；(3) 促进肾脏细胞的凋亡和肾小管萎缩；(4) 诱导损伤部位肾脏细胞释放更多的TGF-β1，通过上述途径加剧肾脏的损伤。
本组研究表明妊娠高血压组患者尿转铁蛋白水平明显高于正常妊娠组，并且随着妊娠期高血压疾病严重程度升高而升高，肾功能异常患者尿液中的转铁蛋白水平明显高于肾功能正常的患者，说明尿转铁蛋白能够反映妊娠期高血压疾病的严重程度，是反映肾脏损伤程度的指标。尿转铁蛋白为中分子蛋白，在正常情况下，不易被肾小球滤过屏障和上皮细胞的裂隙[15]。在妊娠期高血压疾病发生时，肾脏血管出现痉挛，肾脏出现缺血、缺氧，肾小球的通透性明显增强，导致尿液中的转铁蛋白通过滤过膜，通过上皮细胞裂隙进入尿液，导致尿液中的转铁蛋白出现明显增加，本组研究进一步说明了尿转铁蛋白是诊断在妊娠期高血压疾病的早期诊断指标[16-17]。本组研究还发现妊娠高血压患者尿RBP水平与尿TGF-β1和转铁蛋白水平呈正相关，而尿TGF-β1水平与尿转铁蛋白水平呈正相关。RBP和转铁蛋白蛋白是在致病因子作用下导致肾脏滤过膜出现通透性增加，导致尿液中的RBP和转铁蛋白蛋白水平增加，而TGF-β1是促进妊娠高血压综合征发生发展的重要致病因子，三者是否通过某种途径相互具有一定的联系，尚需要进一步研究。
总之，尿RBP、TGF-β1和转铁蛋白水与妊娠高血压严重程度相关，对妊娠高血压综合征患者肾损害的诊断具有重要临床意义。
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