图1 吸氧、气道开放
Fig.1 Oxygen inhalation and airway opening
·基础研究·
【摘要】 目的 探讨适合实验犬左心耳封堵术的麻醉方法。方法 22只行国产新型左心耳封堵器封堵左心耳的拉布拉多犬随机分为戊巴比妥钠组和陆眠宁联合戊巴比妥钠组(联合组)，每组11例。戊巴比妥钠组给予3%戊巴比妥钠1ml/kg腹腔注射，联合组给予陆眠宁0.1ml/kg肌内注射联合3%戊巴比妥钠0.5ml/kg腹腔注射。术中保持呼吸道通畅、吸氧，连续监测血压、心率、心电图、呼吸频率、脉搏血氧饱和度。术中使用麻黄碱提升血压，阿托品和异丙肾上腺素提升心率。观察注药后5(T1)、10(T2)、15(T3)、30min(T4)各时间点镇静镇痛肌松评分；记录术前(t0)、术始5min(t1)、10(t2)、20(t3)、30(t4)、60(t5)、90(t6)、120min(t7)各时点血流动力学指标。观察实验犬苏醒时间、进食时间。结果 与戊巴比妥钠组比较，联合组阿托品、异丙肾上腺素用量显著减少；T4镇静、镇痛、肌松评分均显著降低；t3～t7 MAP、HR显著增高；睁眼、进食时间均提早。结论 陆眠宁复合戊巴比妥钠保留自主呼吸的全身麻醉对实验犬左心耳封堵术安全可行。
【关键词】 左心耳封堵术； 麻醉； 陆眠宁； 戊巴比妥钠； 犬
左心耳封堵术是一种微创心脏介入手术，行股动脉穿刺置管，疼痛刺激强度不大，只要求无体动，无肌松要求，故不考虑气管插管全身麻醉，保留自主呼吸的全身麻醉即可满足手术要求。2016年3月至6月，同济大学附属第十人民医院心内科对22只拉布拉多犬拟行国产新型左心耳封堵器安全性和有效性的动物实验。该实验刺激较小，要求实验犬术中保持安静不体动。本研究对实验犬安全有效的麻醉方式进行探讨，旨在为今后类似动物实验的麻醉方法提供参考。
1.1 实验动物
上海市甲干生物科技有限公司(实验动物部)购置22只标准化试验用拉布拉多犬，犬龄2岁、体质量(25±2.4)kg、雌犬9只雄犬11只，实验动物使用许可证号： SYXK(沪)2011— 0111。手术前3d运送至医院动物中心统一饲养。手术前一晚正常进食后禁食禁水12h，手术当天称体质重。按照随机数字表法把实验犬随机分为戊巴比妥钠组和陆眠宁复合戊巴比妥钠组(联合组)，每组11只。
1.2 方法
1.2.1 手术麻醉方法 戊巴比妥钠组腹腔注射3%戊巴比妥钠1ml/kg(WS20150112，德国分装)，联合组肌内注射陆眠宁(批号150804，吉林省华牧动物保健品有限公司)0.1ml/kg，腹腔注射3%戊巴比妥钠0.5ml/kg。开放前臂或耳缘静脉通路，缓慢滴注生理盐水。待实验犬四肢瘫软，尾部阻力减弱，眼睑反射减弱，对声响无明显反应，肛门和腹壁针刺激无明显反应，用平板抬入手术室妥善固定，吸氧、开放气道，见图1。术中连续监测生命体征，见图2。由同济大学附属第十人民医院心内科医师对22只拉布拉多犬行国产新型左心耳封堵器左心耳封堵术。
图1 吸氧、气道开放
Fig.1 Oxygen inhalation and airway opening
图2 生命体征监测
Fig.2 Vital signs detecting
1.2.2 评价标准 镇静效果评价： 在实验犬耳边敲打手术台，观察犬的反应，无任何反应计10分；有耳动反应计6分；有耳动反应和睁眼计4分，有耳动反应、睁眼、抬头和其他反应计2分。镇痛效果评价： 针刺腹壁、肛门，观察实验犬的反应，体动明显计2分，体动迟钝计6分，无体动计10分。肌松效果评价： 闭合上下颌骨，观察实验犬的咬肌松弛程度，查看舌脱出状态。术中固定犬上下颌骨，咬肌松弛程度无法观察。摆动尾部观察尾力大小： 明显感觉出活动阻力的计2分，阻力稍弱的计6分，无阻力的计10分。
1.2.3 术中异常情况处理 如术中实验犬出现体动，视体动程度腹腔注射小剂量3%戊巴比妥钠。术中如出现收缩压≤90mmHg(1mmHg=0.133kPa)，予麻黄碱10mg静脉滴注或者肌内注射；心率≤50次/min，予阿托品0.5mg静脉滴注或者肌内注射，如无效再次使用0.5mg阿托品，如再次无效使用异丙肾上腺素10mg加入生理盐水中缓慢静脉滴注，维持心率100次/min。上述方法均无效则使用肾上腺素解救。
1.2.4 术后处理 所有实验犬在手术结束后送回动物中心，记录犬术后睁眼时间和自行站立行走、进食时间。
1.3 观察指标
术中连续监测平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)、HR、SpO2、RR、ECG。密切观察麻醉深度、镇痛镇静和肌松效果。记录两组实验犬所用戊巴比妥钠、陆眠宁剂量，阿托品、异丙肾上腺素、肾上腺素剂量。记录注药后5min(T1)、注药后 10min(T2)、注药后15min(T3)、注药后30min(T4)各时间点镇静镇痛肌松评分。记录术前(t0)、术始5min(t1)、术始10min(t2)、术始20min(t3)、术始30min(t4)、术始60min(t5)、术始90min(t6)、术始 120min(t7)各时点血流动力学指标。
1.4 统计学处理
采用SPSS 17.0统计软件分析。正态分布的计量资料以
表示，组间比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 两组实验犬一般情况比较
两组实验犬性别、犬龄、体质量、补液量、手术时间均无统计学差异(P>0.05)，见表1。所有实验犬均顺利完成实验，无1例死亡。
表1 一般资料、静脉通路、补液量、手术时间比较
Tab.1 Comparison of general state, venous channel, volume of input and time of operation
组别n性别雄/雌体质量/kg静脉通路耳缘/股静脉补液量/ml手术时间/min戊巴比妥钠组116/522.0±2.75/6180.7±62.1107.6±18.7联合组116/523.1±1.88/3171.3±66.0113.1±22.1
2.2 麻醉药和血管活性药剂量比较
戊巴比妥钠组戊巴比妥钠用量(29.7±5.6)ml，联合组陆眠宁、戊巴比妥钠用量分别为(2.4±0.1)、(11.5±2.4)ml。与联合组相比，戊巴比妥钠组阿托品、异丙肾上腺素、肾上腺素用量显著增多，差异有统计学意义(P<0.05),见表2。
表2 戊巴比妥钠、陆眠宁、阿托品、异丙肾上腺素、肾上腺素剂量比较
Tab.2 Consumption of sodium pentobarbital, xylazole, atropine, isoproterenol and epinephrine
组别n戊巴比妥钠/ml陆眠宁/ml阿托品/mg异丙肾上腺素/mg肾上腺素/μg戊巴比妥钠组1129.7±5.607.5±1.02.0±0.126±3联合组1111.5±2.42.4±0.13.5±0.1*0.5±0*0*
与戊巴比妥钠组相比，*P<0.05
2.3 镇静镇痛肌松评分比较
戊巴比妥钠组在T4镇静、镇痛、肌松评分均显著高于联合组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。
2.4 血流动力学比较
和联合组比较，戊巴比妥钠组t3～t7 MAP、HR显著降低，差异有统计学意义，P<0.05(表4)。
2.5 复苏比较
戊巴比妥钠组、联合组睁眼时间分别为术后(120.7±36)min和(67.3±22)min，差异有统计学意义(P<0.05)。两组自行站立行走时间分别为术后(170.5±40)min和(104.2±33)min，差异有统计学意义(P<0.05)。
表3 镇静镇痛肌松评分比较
Tab.3 Comparison of sedation, pain scale and effects of muscle relaxation
项目T1T2T3T4戊巴比妥钠组(n=11) 镇静2±0.24±0.86±1.210±2.0 镇痛2±0.24±0.96±1.69.5±2.3 肌松2±0.24±0.86±1.89.2±2.3联合组(n=11) 镇静2±0.34±0.65±1.37±1.5* 镇痛2±0.33±0.85±1.76.7±1.9* 肌松2±0.13±0.25±1.76.8±2.7*
与戊巴比妥钠组相比，*P<0.05
表4 血流动力学比较
Tab.4 Comparison of hemodynamic parameters
项目t0t1t2t3t4t5t6t7戊巴比妥钠组(n=11) MAP/mm-Hg111±48107±33100±4198±3698±4394±4592±2387±30 HR/次126±45122±56102±5684±3389±3087±2689±2891±40联合组(n=11) MAP/mm-Hg117±42104±37100±35103±35*101±40*99±34*103±40*107±35* HR/次136±40123±48113±4299±38*103±41*110±37*108±30*110±42*
与戊巴比妥钠组相比，*P<0.05
戊巴比妥钠为中时作用的巴比妥类催眠药，具有镇静、催眠、抗惊厥作用。用于动物实验麻醉可腹腔注射或静脉注射[1]，10～15min起效，作用时间可维持4～6h，安全范围较窄[2]，其中枢性抑制作用呈剂量依赖性，不易控制给药速度和剂量[3]，容易影响麻醉稳定性或者导致动物死亡[4]。本实验中，戊巴比妥钠组注药30min后镇静镇痛肌松效果肯定，达到安静、镇痛完善、肌肉松弛的手术要求。但戊巴比妥钠对中枢剂量依赖性抑制在注射后50min左右表现出来，主要表现为血压下降，心率减慢。对心血管的抑制作用，使戊巴比妥钠组实验犬MAP降低，HR明显减慢，因此血管活性药物使用显著多于联合组。且因戊巴比妥钠剂量较大，作用时间长，实验犬在术后苏醒缓慢，质量不高。陆眠宁主要成分是盐酸赛拉嗪，是一种强效α2肾上腺素受体激动剂，具有强效镇痛、镇静和肌肉松弛作用，毒性低、安全范围大、无蓄积作用，主要用于家畜、野生动物的化学保定和基础麻醉。肌内或皮下注射吸收快，10～15min起效，一般常用量可持续安静和睡眠状态 1～ 2h，镇痛持续15～30min，维持时间短,难以满足较长时间手术操作的要求[5]。纯种犬剂量 0.03～ 0.035ml/kg，但因为其吸收不完全且不规则，不同种属和个体之间生物利用度差异较大，犬为52%～90%，故犬试验中经常会酌情加大剂量。本实验中，联合组使用陆眠宁0.1ml/kg复合戊巴比妥钠0.5ml/kg的麻醉方案，术中麻醉效果欠佳可根据实际情况小剂量追加戊巴比妥钠，获得了满意的麻醉效果。联合用药减少了单用陆眠宁剂量的2/3，单用戊巴比妥钠剂量的1/3～1/2[6-7]。陆眠宁的使用可以减少戊巴比妥钠的用量，从而减少戊巴比妥钠对心血管系统可能带来的抑制作用，并使实验犬术后早期苏醒早期进食进水成为可能。戊巴比妥钠加强了陆眠宁的中枢性镇痛、镇静作用,取得满意的麻醉深度，满足更加强烈的手术刺激需求。在术中麻醉效果欠佳时，只需根据实际情况追加戊巴比妥钠首次剂量的1/4～1/3即可满足手术需求。陆眠宁联合戊巴比妥钠复合麻醉对犬的麻醉效果优于单一的戊巴比妥钠，联合使用可实现两种药物的优势互补，有利于增强麻醉效果和安全性[8]。
术中需保持实验犬呼吸道畅通，持续吸氧，严密监测生命体征，观察Bp、SpO2、ECG[9]，根据生命体征变化采取相应措施。两组实验犬术中MAP变化不大。实验犬术中心率缓慢较常见，先予阿托品提升心率，如多次注射阿托品无效，根据心率予异丙肾上腺素静脉缓慢滴注效果可靠。
联合组麻醉模型： 陆眠宁0.1ml/kg肌注，复合戊巴比妥钠0.5ml/kg腹腔注射，术中按需追加小剂量戊巴比妥钠。保留自主呼吸、吸氧，术中监测平均动脉压、心率、呼吸频率、脉搏血氧饱和度、ECG。麻黄碱解救低血压，依次使用阿托品、异丙肾上腺素处理心率减慢。
本研究显示，陆眠宁复合戊巴比妥钠，保留自主呼吸的全身麻醉的麻醉方案对心耳封堵术实验是安全有效的，此麻醉方案亦适用于类似的动物实验。
【参考文献】
[1] 赵敬湘，王波，尤国兴，等.戊巴比妥钠静脉麻醉对比格犬血液流变特性与静脉血气的影响[J].中国输血杂志，2016,29(4)： 361-363.
[2] 张亚飞,胡殿宇,马宇,等.速眠新Ⅱ联合戊巴比妥钠在犬麻醉中的应用[J].河南外科学杂志,2013,19(1)： 19-20.
[3] 陈春芳.陆眠宁联合戊巴比妥钠对犬麻醉效果评价[J].湘南学院学报(医学版)，2014，16(3)： 49-50.
[4] 张阔，田枫，康爱君，等．实验用比格犬戊巴比妥钠麻醉并发症的观察及处理[J].实验动物科学，2007，24(2)： 32-34.
[5] 周立才,张秀兰,石晶,等.实验动物麻醉的应用研究[J].腹腔镜外科杂志,2013,18(8)： 634-637.
[6] 吴曙光，巫全胜，赵菊花，等.速眠新Ⅱ与戊巴比妥钠对实验用白香猪麻醉效果的观察[J].实验动物科学，2007,24(2)： 24-26.
[7] 周小林，唐秋姗，雷艳，等.戊巴比妥钠联合速眠新Ⅱ在犬手术中的麻醉效果[J].华南国防医学杂志，2012,26(4)： 313-315.
[8] 吴清洪,那顺巴雅尔,陈丽,等.戊巴比妥钠联用速眠新II对西藏小型猪麻醉效果观察[J].中国比较医学杂志,2008,18(10)： 29-31.
[9] 王立军，胡魁，张昊，等.3种复合麻醉剂对小型猪心电图的影响[J].中国兽医杂志，2013,49(5)： 70-72.
Anesthesia method for left atrial appendage occlusion in dogs
【Abstract】 Objective To investigate the anesthetic methods for occlusion of left atrial appendage in dogs. MethodsTwenty-two Labrador dogs undergoing operation for occlusion of left atrial appendage were randomly assigned into combination group and pentobarbital pentobarbital group with 11 animals in each group. Dogs in pentobarbital group
received：3% sodium pentobarbital intraperitoneally for anesthesia and those in combination group received the intramuscular injection with 0.1ml/kg xylazole and intraperitoneal injection with 0.5ml/kg sodium pentobarbital. During the operation mean blood pressure (MBP), heart rate (HR), ECG, respiratory rate, blood oxygen saturation were monitored continuously. Ephedrine, atropine and isoproterenol were used to maintain blood pressure and heart rate, respectively. Sedation, pain scale and effects of muscle relaxation were evaluated at 5min (T1), 10min (T2), 15min (T3) and 30min (T4) after anesthetic injection. Hemodynamic parameters were measured before operation (t0), and at different time points of intraoperative 5min (t1), 10min (t2), 20min (t3), 30min (t4), 60min (t5), 90min (t6) and 120min (t7). The times of awakening and eating were observed. Results Compared with pentobarbital group, the dosage of atropine and isoproterenol in combination group were significantly reduced. The sedation, analgesia and muscle relaxation scores at T4 were significantly reduced in combination group. MAP and HR at T3 to T7 in combination group were significantly increased, earlier awaking and eating time were observed in the combination group. Conclusion Combined pentobarbital sodium with pentobarbital is safe and feasible for left atrial appendage occlusion operation under general anesthesia with spontaneous respiration in dogs.
【Key words】 left atrial appendage closure; anesthesia; xylazole; sodium pentobarbital; canine
doi： 10.16118/j.1008-0392.2017.04.009
收稿日期： 2017-02-10
【中图分类号】 R614
【文献标志码】 A
【文章编号】 1008-0392(2017)04-0041-04