·下期论著摘要预告·
【摘要】目的 通过研究小干扰RNA(small interfering RNA， siRNA)沉默人乳腺癌MDA-MB-231细胞中YAP基因的表达，观察YAP基因沉默后对人乳腺癌MDA-MB-231细胞功能的影响。方法 使用阳离子脂质体转染试剂LipofectamineTM 2000将靶向沉默YAP基因的siRNA序列转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞中，采用实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real time-polymerase chain reaction， qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测转染后MDA-MB-231细胞中YAP基因及蛋白的表达水平，噻唑蓝(MTT)实验和细胞平板克隆实验用来检测转染前后细胞增殖的变化，Transwell小室和划痕实验用来观察转染对细胞侵袭及迁移的影响，流式细胞术用来评价转染后细胞周期及凋亡的变化情况。结果 转染siRNA后，YAP RNA和蛋白的表达量相对于空白对照及阴性对照组均明显下降(P<0.01)。MTT实验及细胞平板克隆实验结果显示，siRNA干扰YAP表达可以显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖活性，Transwell小室及划痕试验显示，siRNA干扰YAP的表达可以明显抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭及迁移能力，细胞周期实验显示，沉默YAP后，细胞周期出现G0/G1期阻滞，细胞凋亡检测证实沉默YAP后细胞凋亡率并未出现明显上升。结论 抑制YAP在乳腺癌细胞的表达可有效降低细胞的增殖、迁移和侵袭能力，改变细胞周期分布，但对细胞凋亡无明显影响。
【关键词】乳腺肿瘤； Yes相关蛋白； siRNA； 细胞功能