表示，多组间比较方差分析，两组间比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。·临床研究·
【摘要】目的 观察单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1， MCP-1)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor， HGF)、转化生长因子-β1(transforming growth factor -β1， TGF-β1)在子宫内膜异位症(endometriosis, EMs)中的表达及意义。方法 选择2012年1月至2013年12月EMs患者68例为EMs组，按照美国生育协会修正评分(r-AFS)进行分期： Ⅰ期～Ⅱ期31例，Ⅲ期～Ⅳ期37例；按照痛经评分分为： 0～1分42例，2～3分26例。选择同期确诊的良性肿瘤患者30例为疾病对照组，健康妇女20例为健康对照组。观察各组MCP-1、HGF、TGF-β1水平的变化及EMs分期、痛经评分与MCP-1、HGF和TGF-β1水平的关系。结果 EMs组的MCP-1、HGF和TGF-β1水平明显高于健康对照组和疾病对照组(P<0.01)，而健康对照组与疾病对照组差异无统计学意义(P>0.05)。随着EMs分期和痛经评分的升高，MCP-1水平明显降低(P<0.05)，而HGF和TGF-β1水平明显升高(P<0.01)，差异均有统计学意义。结论 MCP-1、HGF、TGF-β1可能参与了EMs的发生发展过程，检测其水平有利于了解EMs的分期和痛经的严重程度。
【关键词】子宫内膜异位症； 单核细胞趋化蛋白-1； 肝细胞生长因子； 转化生长因子-β1
子宫内膜异位症(endometriosis， EMs)是妇科的常见病和多发病，其诊断往往需要病理检查才能确诊，给诊断和治疗带来一定的困难。研究[1]表明，EMs的发生发展与机体分泌的多种细胞因子具有重要关系。同济大学附属同济医院自2012年1月至2013年12月对EMs患者血清检测单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1， MCP-1)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor， HGF)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1， TGF-β1)，探讨其与EMs分期和痛经评分的关系，为EMs的诊断及治疗提供参考。
1.1 一般资料
选择2012年1月至2013年12月在我院就诊EMs患者68例，月经规律，均经手术证实为EMS，分为EMs组。术前3个月未经激素或者药物治疗。年龄20～46岁，平均(35.98±5.18)岁，按照美国生育协会修正评分(r-AFS)进行分期： Ⅰ期～Ⅱ期31例，Ⅲ期～Ⅳ期37例；按照痛经评分分为： 0～1分42例，2～3分26例。选择同期在我院确诊的良性肿瘤患者30例为疾病对照组，年龄20～44岁，平均(35.43±6.13)岁，良性疾病组成： 卵巢成熟畸胎瘤10例，卵巢浆液性囊腺瘤8例，卵巢黏液性囊腺瘤8例和卵巢纤维瘤4例。同时选择同期在我院体检的健康妇女20例，为健康对照组，年龄 20～45岁，平均(35.67±5.49)岁。所有的患者均知情同意，并排除有急慢性炎性疾病，恶性肿瘤；急性心肝肾等重要脏器功能障碍的患者。3组年龄差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 血液标本的收集及检测 所有患者在入院时第1天抽取肘外周静脉血，约5ml左右，放置在抗凝试管。离心半径10cm，2000r/min，离心10min，取血清放置在-20℃的冰箱中待测。MCP-1，HGF和TGF-β1均采用酶联免疫吸附测定，试剂盒由武汉博士德公司提供，按照试剂盒说明操作。
1.2.2 痛经评分评定 痛经患者按照参考文献的方法进行痛经评分： 无痛经为0分；有痛经，无需服药，不影响日常工作和生活者为1分；有痛经，需要服药后缓解，对日常工作和生活有影响者为2分；痛经需要服药治疗，并且影响正常的生活，不能进行工作者为3分。
1.2.3 观察指标 观察各组MCP-1、HGF和TGF-β1水平的变化，EMs不同分期和不同痛经评分与MCP-1、HGF和TGF-β1水平的关系。
1.3 统计学处理
采用SPSS 15.0软件。计量资料以表示，多组间比较方差分析，两组间比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 各组MCP-1、HGF、TGF-β1水平的变化
EMs组的MCP-1、HGF和TGF-β1水平明显高于健康对照组和疾病对照组(P<0.01)，而正常对照组和疾病对照组差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。
表1 各组MCP-1、HGF和TGF-β1水平的变化
Tab.1 Serum levels of MCP-1, HGF and TGF-β1 in EMs and control groups
组别nMCP-1/(ng·L-1)HGF/(ng·ml-1)TGF-β1/(ng·L-1)正常对照组20146.68±31.680.196±0.0160.57±0.12疾病对照组30150.55±33.490.203±0.0180.61±0.15EMs组68226.54±35.610.526±0.0271.72±0.68F值93.1533453.96381.079P值0.0000.0000.000
2.2 不同EMs分期患者MCP-1、HGF、TGF-β1水平的变化
随着EMs分期的升高，MCP-1水平出现明显降低(P<0.05)，而HGF和TGF-β1水平出现明显升高(P<0.01)，差异均有统计学意义，见表2。
表2 不同EMs分期患者MCP-1、HGF和TGF-β1水平的变化
Tab.2 Serum levels of MCP-1, HGF and TGF-β1 in patients with different EMs stages
r-AFS分期nMCP-1/(ng·L-1)HGF/(ng·ml-1)TGF-β1/(ng·L-1)Ⅰ期～Ⅱ期31238.45±31.540.349±0.0241.26±0.56Ⅲ期～Ⅳ期37216.56±36.980.674±0.0312.11±0.72t值2.59747.6105.353P值0.0110.0000.000
2.3 不同痛经程度EMs患者MCP-1、HGF、TGF-β1水平的变化
随着痛经评分的升高，EMs患者MCP-1水平明显明显降低，而HGF和TGF-β1水平出现明显升高(P<0.01)，差异均有统计学意义，见表3。
表3 不同痛经程度EMs患者MCP-1、HGF和TGF-β1水平的变化
Tab.3 Serum levels of MCP-1, HGF and TGF-β1 in patients with different dysmenorrhea scores
痛经评分/分nMCP-1/(ng·L-1)HGF/(ng·ml-1)TGF-β1/(ng·L-1)0～142237.36±32.580.351±0.0251.21±0.612～326209.06±37.150.809±0.0302.54±0.77t值3.29867.9697.895P值0.0020.0000.000
EMs患者的免疫功能异常已经收到广泛的关注。研究[2]发现，EMs患者外周血的MCP-1水平的升高，且其可能在EMs发病过程中起到重要作用。本研究表明，EMs组的MCP-1水平明显高于疾病对照组和健康对照组，且EMs分期较低和痛经评分较低的患者MCP-1水平明显高于EMs分期高和痛经评分高的患者。文献[3]报道，EMs患者的MCP-1水平高于正常人群，并且在EMs发病初期阶段更为明显，本研究与其结论相一致。MCP-1是巨噬细胞变化的关键因子，具有促进细胞黏附和趋化作用的细胞。在EMs发病早期MCP-1的水平和趋化活性明显增加，MCP-1进一步诱导巨噬细胞的活化和参与机体免疫激活，是机体的炎性细胞浸润持久化，从而形成正反馈，扩大EMs患者的无菌反应，促进机体EMs发生发展，参与EMs不孕的发生[4]。高浓度的MCP-1直接刺激子宫内膜细胞增生，加速异位内膜植入的进程，促进血管和炎性细胞的反应相伴行[5]，故MCP-1水平的可能是内膜侵入基层的激发因子。
本研究发现，EMs患者的HGF水平明显高于健康对照组和疾病对照组，并且随着疾病严重程度的增加及痛经评分的增加，其水平出现明显的升高，与现有的结果类似[6]。HGF是来源于间质细胞的多功能的细胞生长因子，其对间质细胞具有调节作用。研究表明，HGF可能参与了子宫内膜的重建和修复，且HGF刺激细胞的增殖具有剂量依赖关系[7]。研究表明，子宫内膜间质细胞HGF水平明显高于健康对照组，其作为各种上皮细胞强大的分裂源和促运动源，促进子宫内膜细胞在腹腔中的迁徙和增殖[8]。同时HGF作为潜在的血管生成因子，上调HGF可能改变可EMs患者的微环境，促进子宫内膜在盆腔中的种植，并促进异位病灶在盆腔的发生发展[9]，高水平的HGF可以通过与C-Met结合，进一步增强子宫内膜异位细胞的增殖和侵袭，促进EMs的发生发展。
本研究表明，EMs患者的TGF-β1水平明显高于健康对照组和疾病对照组，并且随着疾病分期和痛经评分的升高，其水平逐渐升高，与文献[10]报道的TGF-β1水平与EMs严重程度呈正相关一致。TGF-β为多种能的细胞因子，具有5种异构体，其中以TGF-β1的功能最强，其表达主要对免疫功能具有抑制作用，主要包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞的抑制，而逃脱免疫系统的识别，产生类似肿瘤细胞侵袭性[11]。同时TGF-β1可以促进机体的纤维母细胞增殖，胶原沉积，导致纤维蛋白的形成，促使盆腔广泛粘连的形成，造成患者不孕不育形成[12]。TGF-β1还可以通过作用于内皮细胞和促血管生成因子共同作用于机体，创造易于血管的形成的环境，导致异位病灶的微血管的形成，促进异位内膜种植的接受性增加，促进异位内膜的发生发展[13]。故TGF-β1参与了EMs发病机制中的侵袭、黏附和血管生成的每个环节。
MCP-1、HGF和TGF-β1可能参与了EMs的发生发展过程，检测其水平有利于了解EMs的分期和痛经的严重程度。
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Serum levels of monocyte chemoattractant protein-1, hepatocyte growth factor and transforming growth factor -β1 in patients with endometriosis
【Abstract】Objective To investigate serum levels of monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1), hepatocyte growth factor(HGF), transforming growth factor-β1(TGF-β1) in patients with endometriosis(EMs) and their significance. Methods Sixty eight patients with EMs admitted in the hospital from January 2012 to December 2013 were enrolled in the study. According to the American Fertility Society revised score(r-AFS) 31 cases were classified as stage Ⅰ-Ⅱ and 37 as stage Ⅲ-Ⅳ; and according to dysmenorrhea score 42 cases had score 0-1 and 26 had score 2-3. Thirty patients with benign tumor served as disease control group and 20 healthy women as healthy control group. Serum levels of MCP-1, HGF and TGF-β1 were measured with ELISA method. The correlation of MCP-1, HGF and TGF-β1 levels with EMs stage and dysmenorrhea score was analyzed. Results Serum levels of MCP-1, HGF and TGF-β1 in EMs group were significantly higher than those in healthy control group and disease control group(P<0.01), while there were no significant differences between healthy control group and disease control group(P>0.05). As the EMs stage and dysmenorrhea score elevated, the levels of MCP-1 decreased significantly(P<0.05), while the levels of HGF and TGF-β1 levels significantly increased(P<0.01). Conclusion Serum MCP-1, HGF and TGF-β1 levels are associated with the disease stage and severity of dysmenorrhea in patients with endometriosis.
【Key words】endometriosis; monocyte chemotactic factor-1; hepatocyte growth factor; transforming growth factor -β1
doi：10.16118/j.1008-0392.2015.01.014
收稿日期：2014-07-18
基金项目：上海市卫生局项目(2011Y059)
【中图分类号】R 711.71
【文献标志码】A
【文章编号】1008-0392(2015)01-0063-04