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杨奕清,刘懿,董雄剑,林捷,陈义汉.心肌特异性表达人KCNE4转基因小鼠模型的建立[J].同济大学学报（医学版）,2006,(6):1-5. [点击复制]
- .Modeling of Transgenic Mice Cardiac- specifically Overexpressing Human KCNE4 Gene[J].同济大学学报（医学版）,2006,(6):1-5. [点击复制]
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| 摘要: |
| 目的本研究旨在建立心肌特异性表达人KCNE4（hKcNE4）基因小鼠模型，为探索hKCNE4基因对特定类型心房颤动的防治作用奠定基础。方法通过RT—PCR克隆hKCNE4基因，使用核酸内切酶和连接酶构建hKCNE4基因心肌特异性表达载体hKCNE4α—MHC-Clone26，经过酶切鉴定、序列分析证实无误后用BamHI酶切获得转基因表达元件hKCNE4-α—MHC-hGHpA。将hKCNE4-α—MHC-hGHpA显微注入小鼠受精卵雄性原核，并将有活力的受精卵移植到代孕小鼠的输卵管。PCR鉴定出代孕鼠所生小鼠中转基因阳性原代（G0）小鼠，运用RT—PCR-测序技术对阳性G0小鼠与野生型小鼠交配所生的一代（G1）小鼠进行检测以识别出表达转基因的阳性小鼠。结果成功克隆了hKCNE4基因，正确构建了hKCNE4基因心肌特异性表达载体hKCNE4-α—MHC-Clone26。代孕鼠共生产86只仔鼠，9只转基因阳性，2只（分别称其为LineA和LineB）转基因在心脏中高表达。对LineA和LineB的阳性后代进行初步表型分析发现其生长发育良好，繁殖力正常，体表心电图无明显异常。结论成功建立心肌特异性表达hKCNFA转基因小鼠模型，为进一步研究hKCNFA基因对特定类型心房颤动的防治作用提供了一种工具。 |
| 关键词: KCNE4 转基因 心律失常 小鼠 |
| DOI： |
| 修订日期：2006-07-15 |
| 基金项目:国家杰出青年科学基金（30425016）,国家自然科学基金（30570768;30330290）.海外青年学者合作研究基金（30528011）,教育部科学技术研究重点项目（104081）、上海市优秀学科带头人计划项目（05XD14014） |
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| Modeling of Transgenic Mice Cardiac- specifically Overexpressing Human KCNE4 Gene |
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| Abstract: |
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| Key words: KCNE 4 transgene arrhythmia rats |
